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| ※首 页 —> 微生物培养基 ： |
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| 营养琼脂培养基 用 途： 一般细菌总数测定，保存菌种及纯培养。（《中华人民共和国药典》2005年版） 原 理： 蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；氯化钠能维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂。 |
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使用方法：
1、?? 称取本品32.0g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。
2、?? (食品)以无菌操作称取检样25.0克（或25.0mL），放入含有225.0mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中（瓶内预置适当数量的玻璃珠），充分振摇，即为1：10的均匀稀释液。依次做1：100，1：1000……稀释液。
3、?? 根据对样品污染情况的估计，选择2～3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1.0mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。
4、?? 稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15.0mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1.0mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后，倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
5、?? 观察结果。
6、?? 菌落计数方法：
做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
7、?? 菌落计数的报告：??????????????????? ?????????????????????????????
选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时（菌落之间无明显界线），若仅有一条链，可视为一个菌落；如有不同来源的几条链，则应将每条链视为一个菌落计。
A：稀释度的选择：
应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之(见附表)。
若有两个稀释度.其生长的菌落数无均在30～300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2，则应报告其平均数；若大于2则报告其较小的数字(见表中例2及3)。
若所有稀释度的平均菌落数均大于300则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)。
若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最底的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5)。
若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最底稀释倍数报告之(见表中例6)。
若有稀释度的平均菌菌落数均不在30～300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。
?
菌落数的报告：
??? 菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用二位有效数字，在二位数字后面的有效数值，以四舍五入法计算。为了缩短数字后面的零数，也可以用10的指数来表示(见表中“报告方式栏”)。
稀释度选择及菌落数报告方式
例次 |
稀释液及菌落数 |
|
|
两稀释液之比 |
菌落总数个/g或mL |
报告方式个/g或mL |
|
10-1 |
10-2 |
10-3 |
? |
? |
? |
1 |
多不可计 |
164 |
20 |
—— |
16 400 |
16 000或1.6×104 |
2 |
多不可计 |
295 |
46 |
1.6 |
37 750 |
3 8000或3.8×104 |
3 |
多不可计 |
271 |
602.2? |
—— |
27 100 |
27 000或2.7×104 |
4 |
多不可计 |
多不可计 |
313? |
—— |
31 300? |
31 0000或3.1×105 |
5 |
27 |
11 |
5?? |
—— |
270 |
270或2.7×102 |
6? |
0 |
0 |
0?? |
—— |
＜1×10 |
＜10 |
7 |
多不可计 |
305 |
12 |
—— |
30 500 |
? 31 000或3.1×104 |
?
质量控制：
????? ?????本品接种下列菌株，置于36±1℃温箱中培养48±2h，结果如下：
?
菌 名 |
菌 号 |
生长状况 |
菌落特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
良好 |
白色—灰白色，圆形，边缘整齐，表面光滑，湿润。
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
良好 |
黄色，圆形，边缘整齐，表面光滑、湿润，不透明。 |
?
贮??? 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
?
规??? 格： 250g
参考文献：
GB/T4789.2－2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 菌落总数测定
GB/T4789.28－2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法，培养基和试剂
GB15979－2002 中华人民共和国国家标准 一次性使用卫生用品卫生标准
参考文献：
GB/T4789.2－2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 菌落总数测定
GB/T4789.28－2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法，培养基和试剂
GB15979－2002 中华人民共和国国家标准 一次性使用卫生用品卫生标准
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